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有許多方法適用于定量樣品中核酸的數(shù)量，但紫外-可見光吸光度法是確定樣品中DNA或RNA濃度和純度的主要方法。單鏈和雙鏈DNA都強(qiáng)烈吸收峰值吸光度波長為260nm的紫外線。簡單的濃度和純度測量涉及直接以微量方法或包含在塑料或玻璃比色皿中穿過樣品的光譜。根據(jù)Beer-Lambert定律，光穿過樣品的衰減與濃度和光穿過樣品的距離成正比DNA可以吸收亞可見光譜上光的目標(biāo)物質(zhì)。各種蛋白質(zhì)的芳香族氨基酸和核糖核酸（RNA）都吸收大約260–280nm的光。鑒于難以確保樣品的絕對純度，樣品...

超微量吸光度分光光度計在與蛋白質(zhì)分析、提取和純化相關(guān)的實驗室和分析機(jī)構(gòu)中無處不在。生物化學(xué)和生命科學(xué)應(yīng)用中蛋白質(zhì)濃度測量的兩種技術(shù)是DeNovix的DS-11系列分光光度計/熒光計和賽默飛世爾科技的NanoDrop™系列儀器。這些分析工具中的每一種都能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白質(zhì)定量和質(zhì)量測量，并具有出色的檢測限。ThermoFisherNanoDrop™系列儀器開創(chuàng)了現(xiàn)代微量分析技術(shù)，用于測量1-2μL范圍內(nèi)樣品中的蛋白質(zhì)濃度。ThermoFisherNanoDro...

測量蛋白質(zhì)的紫外光吸收是微量蛋白質(zhì)濃度和純度分析最直接的方法。芳香族氨基酸和許多蛋白質(zhì)的殘基表現(xiàn)出很強(qiáng)的紫外線吸收，在280nm處達(dá)到峰值。吸收的光量與樣品的濃度成正比。使用Beer-Lambert方程，可以將蛋白質(zhì)量化為這種吸收行為的一個因素。直接UV吸光度測量是一種簡單有效的純化蛋白質(zhì)方法，但它們并不是通用的定量方法。相反，分光光度法技術(shù)必須根據(jù)對分析物的理解以及樣品中是否存在可能干擾280nm直接定量的緩沖液或溶劑進(jìn)行定制。本文將探討用于蛋白質(zhì)微量分析和生物化學(xué)應(yīng)用的四...

熒光檢測在使用熒光法進(jìn)行樣品定量的生化和生命科學(xué)應(yīng)用中至關(guān)重要。這些樣品包含與目標(biāo)分析物特異性結(jié)合的熒光基團(tuán)，并表現(xiàn)出不同的激發(fā)和發(fā)射特性。與已知標(biāo)準(zhǔn)品的熒光相比，發(fā)射光的強(qiáng)度與樣品濃度相關(guān)。熒光檢測可實現(xiàn)極其精確的生物分子檢測，例如，雙鏈DNA定量至0.0005ng/μL（ng/μl）。這種創(chuàng)新技術(shù)的應(yīng)用經(jīng)常受到以下事實的限制：傳統(tǒng)熒光計配備的激發(fā)和發(fā)射通道很少——通常只有一個光源和光學(xué)檢測器，適用于窄范圍的熒光檢測或特定于一個制造商的產(chǎn)品。多個熒光通道使科學(xué)家能夠使用來自...

吸光度測量基礎(chǔ)知識紫外-可見光吸光度測量長期以來一直是生命科學(xué)實驗室中定量純化生物分子的標(biāo)準(zhǔn)方法。該方法允許根據(jù)分子在特定波長下的吸光度曲線快速檢測分子。吸光度還提供樣品污染的指示。吸光度光譜的形狀將根據(jù)其他分子的存在而變化，這些分子的吸收波長與目標(biāo)分子相同或接近相同波長。熒光定量基礎(chǔ)知識熒光團(tuán)是吸收一個波長（激發(fā)波長）的光并發(fā)射另一個波長（發(fā)射波長）的光的分子。某些熒光團(tuán)的結(jié)構(gòu)只有在與特定分子（例如雙鏈DNA）結(jié)合時才能發(fā)出熒光。熒光檢測利用這種結(jié)合特異性來建立樣品發(fā)射的熒...

紫外-可見分光光度法是一種強(qiáng)大的分析技術(shù)，用于各種科學(xué)領(lǐng)域，用于測量電磁波譜的紫外（UV）和可見光（Vis）范圍內(nèi)的光吸收率。通過測量通過樣品溶液的光強(qiáng)度并將其與入射光的強(qiáng)度進(jìn)行比較，紫外-可見分光光度計提供了有關(guān)材料特性及其與光相互作用的寶貴信息。本篇博客文章將介紹紫外-可見分光光度法的組成部分、工作原理、應(yīng)用和優(yōu)勢。紫外-可見分光光度計的工作原理當(dāng)入射光照射到物體上時，它可以被吸收、反射或透射。分光光度計可測量在UV和Vis范圍內(nèi)吸收的光的強(qiáng)度。測量通過樣品傳輸?shù)墓猓⑴c...