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唾液樣本可以以方便、微創(chuàng)、可重復(fù)的方式采集。唾液是一種復(fù)雜的異質(zhì)生物樣本，如果收集不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。然而，通過(guò)遵循正確的唾液采集和處理程序，可以從這種樣本類型中獲得高質(zhì)量、可重復(fù)的數(shù)據(jù)。 收集唾液之前要考慮什么？
唾液中許多分析物的水平不會(huì)保持靜態(tài)，濃度可能會(huì)因多種影響而發(fā)生變化 (1-5)。個(gè)體之間的樣本也可能存在很大差異。根據(jù)感興趣的分析物和研究的性質(zhì)，有幾個(gè)因素可能很重要：
收集時(shí)間——大多數(shù)激素表現(xiàn)出晝夜節(jié)律的表達(dá)，對(duì)于某些唾液蛋白來(lái)說(shuō)也是如此。基于皮質(zhì)醇的研究尤其受到晝夜周期中皮質(zhì)醇表達(dá)節(jié)律的影響，并且針對(duì)皮質(zhì)醇晝夜表達(dá)的特定研究是研究設(shè)計(jì)的核心。我們建議查看文獻(xiàn)中的最新建議或根據(jù)待測(cè)試的分析物向?qū)＜易稍兙唧w建議。對(duì)于大多數(shù)研究來(lái)說(shuō)，樣本收集應(yīng)該在特定時(shí)間或在一個(gè)時(shí)間窗口內(nèi)進(jìn)行，以獲得最有意義的測(cè)量。
反應(yīng)和恢復(fù)特征——如果研究涉及干預(yù)措施和壓力源，則應(yīng)定時(shí)收集樣本以正確捕獲反應(yīng)。對(duì)于持續(xù)數(shù)月的較長(zhǎng)間隔研究或測(cè)量壓力反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室壓力源研究來(lái)說(shuō)，情況確實(shí)如此。
吸收裝置可能會(huì)收集局部唾液而不是整個(gè)唾液，這可能會(huì)影響某些分析物的結(jié)果。 α-淀粉酶和分泌型 IgA 等蛋白質(zhì)的唾液水平確實(shí)根據(jù)口腔位置的不同而有所不同 (6-8)。我們建議將吸收裝置放置在唾液聚集的位置。對(duì)于直立坐著的成人或兒童來(lái)說(shuō)，口腔底部（舌頭下方）是理想的位置。對(duì)于處于傾斜位置的嬰兒、成人和兒童，我們建議將頭轉(zhuǎn)向一側(cè)，并從“積聚"唾液的臉頰一側(cè)收集唾液。當(dāng)通過(guò)被動(dòng)口水收集唾液時(shí)，我們建議讓唾液積聚在舌下，并通過(guò)吸管狀收集輔助裝置輕輕地將收集到的口水推入管中。該樣本還將代表從所有唾液腺收集的唾液，并消除從特定唾液腺收集唾液的任何偏差。
一些親水性分析物（例如 DHEA-S 和/或較大蛋白質(zhì)（例如 SIgA））的水平隨著唾液流速的增加而降低，并且唾液 α-淀粉酶也可能受到類似影響 (9, 10)。目前，我們建議研究人員共同改變 α-淀粉酶、SIgA 和 DHEA-S 等分析物的分泌速率 (mL/min)。
記錄收集所需唾液量所需的總時(shí)間，以便測(cè)定結(jié)果可以乘以流速（mL/分鐘），以便將結(jié)果表示為分泌率（每單位時(shí)間的輸出）。
示例 (SIgA)：205.60 µg/mL x 1.33 mL/min = 273.45 µg/min
要確定使用吸收裝置收集唾液時(shí)的流速，請(qǐng)?jiān)谑占昂髮?duì)拭子和儲(chǔ)存管一起稱重。 （唾液密度可假定為 1.0 g/mL 的近似值。）同時(shí)記錄拭子在口腔中的時(shí)間長(zhǎng)度，以便可以估計(jì)流速。
現(xiàn)代免疫測(cè)定設(shè)計(jì)為使用小樣本量（小于 100 µL），并且在大多數(shù)情況下，不需要刺激劑來(lái)收集足夠的樣本量。我們建議在收集唾液樣本時(shí)不要使用口腔刺激劑，因?yàn)榭赡軙?huì)導(dǎo)致測(cè)定干擾或某些分析物水平的改變 (11)；目標(biāo)應(yīng)該是盡量減少唾液測(cè)試結(jié)果中不必要的變異來(lái)源。例如，即使咀嚼無(wú)味的石蠟/蠟也可能影響流量依賴性分析物。
如果刺激劑是絕對(duì)必要的（不使用刺激劑就無(wú)法收集唾液）；
在整個(gè)研究過(guò)程中以一致的方式謹(jǐn)慎使用 (12)。
在使用口服刺激劑之前，考慮使用嗅覺(jué)或視覺(jué)刺激。
在實(shí)際收集之前嘗試與研究參與者一起練習(xí)，以確保在實(shí)際研究收集之前熟悉該方法。
進(jìn)行試點(diǎn)研究以確?？诜碳┎粫?huì)造成測(cè)定或分析物干擾 (11)。
在樣品采集之前，請(qǐng)查看分析物采集方案或根據(jù)要執(zhí)行的檢測(cè)的數(shù)量和類型
如果您計(jì)劃在當(dāng)前的研究中包括 DNA 分析，正在存檔以供將來(lái)某個(gè)日期進(jìn)行 DNA 分析，或者希望對(duì)之前存檔的現(xiàn)有樣本進(jìn)行 DNA 分析
許多分析物在體循環(huán)中的水平高于唾液中的水平，并且在特定條件下血液污染可能是一個(gè)問(wèn)題 (21-24)。我們建議如下：
我們建議如下：
參與者在樣本采集前 45 分鐘內(nèi)不應(yīng)刷牙 (23)。
樣本采集前 24 小時(shí)內(nèi)不應(yīng)進(jìn)行牙科工作。
研究參與者應(yīng)該接受口腔健康問(wèn)題或損傷的篩查。
明顯被血液污染的唾液樣本應(yīng)丟棄并重新收集（22）。
從口腔健康問(wèn)題高風(fēng)險(xiǎn)人群采集的樣本可以使用 Salimetrics 血液污染檢測(cè)試劑盒（Salimetrics 項(xiàng)目 1-1302；1-1302-5）進(jìn)行篩查。
所使用的收集協(xié)議與待測(cè)試的分析物兼容至關(guān)重要。有些分析物只能用被動(dòng)滴液收集的樣品進(jìn)行測(cè)試。使用拭子測(cè)量這些分析物可能會(huì)導(dǎo)致所測(cè)量的分析物回收率過(guò)高或過(guò)低。
并非所有拭子都是一樣的。我們建議使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證可用于測(cè)量目標(biāo)分析物的拭子。一些制造商擁有專門針對(duì)皮質(zhì)醇的拭子，并且僅針對(duì)皮質(zhì)醇的測(cè)量進(jìn)行了驗(yàn)證。使用此拭子測(cè)量另一種激素（例如睪酮）可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。使用棉花作為拭子材料已在文獻(xiàn)中被證明是可變結(jié)果的來(lái)源，如果需要一致的結(jié)果且不被生物材料混淆，則不推薦使用棉花。 Salimetrics 已證實(shí)，來(lái)自棉花采集設(shè)備的數(shù)據(jù)通常與 Shirtcliff、EA 等人的論文（2001 年）被廣泛引用的相匹配。然而，基于棉花的方法也會(huì)增加變異性，并提供與“真正的被動(dòng)流口水"值顯著不同的數(shù)據(jù)結(jié)果，如下圖所示；
通過(guò) SalivaBio 口腔拭子測(cè)量收集的唾液樣本與通過(guò)被動(dòng)流口水獲得的樣本非常接近。 N=10
在樣品采集之前研究并遵循基本分析物穩(wěn)定性和儲(chǔ)存建議至關(guān)重要。僅使用高質(zhì)量聚丙烯收集管和小瓶來(lái)儲(chǔ)存樣品。聚苯乙烯或其他未經(jīng)驗(yàn)證的塑料管可能會(huì)對(duì)分析物的測(cè)量值產(chǎn)生不利影響。所有SalivaBio 收集管和小瓶均由優(yōu)質(zhì)聚丙烯制成。
Salimetrics 建議所有樣品在采集后立即冷凍。然而，如果這是不可能的，研究人員應(yīng)該考慮：
一些不穩(wěn)定的分析物在室溫下會(huì)快速變化（即肽和蛋白質(zhì)）
對(duì)于某些分析物，例如（脫氫表雄酮、黃體酮、雌二醇），應(yīng)盡量減少凍融循環(huán)
Salimetrics是一家全球著名的唾液生物學(xué)研究領(lǐng)域?qū)I(yè)產(chǎn)品供應(yīng)商，其在唾液的收集方法、生物學(xué)性質(zhì)及其（唾液中各生物組分的含量）定量檢測(cè)技術(shù)擁有絕對(duì)的研發(fā)與產(chǎn)品供應(yīng)優(yōu)勢(shì)。作為唾液生物學(xué)研究及診斷試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，其供應(yīng)的唾液手機(jī)方案及唾液成分的ELISA檢測(cè)試劑盒均專門唾液的理化性質(zhì)所設(shè)計(jì)，可確保客戶在科學(xué)研究或臨床診斷中得到穩(wěn)定、準(zhǔn)確的唾液生物學(xué)信息，并同時(shí)具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果精確可靠、可重復(fù)性高、耗時(shí)少等諸多優(yōu)點(diǎn)。Salimetrics的唾液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室及擁有豐富的唾液生物學(xué)研發(fā)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)團(tuán)隊(duì)可以為廣大客戶提供唾液生物學(xué)研究及診斷應(yīng)用的專業(yè)指導(dǎo)。
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